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CKSLAB程序降溫盒如何提高細(xì)胞凍存的存活率
點擊次數(shù):797 更新時間:2022-11-26
CKSLAB程序降溫盒是對物品溫度按照規(guī)定程序要求進(jìn)行降溫冷凍的一種裝置,是生物細(xì)胞進(jìn)入凍存前的一道核心工序。
CKSLAB程序降溫盒的工作原理是利用微機控制技術(shù)和設(shè)計的軟件,通過精準(zhǔn)地控制液氮的施放量,確保被凍存的生物制品以適宜的冷凍速率降溫冷凍,從而達(dá)到程序降溫的目的,目前廣泛應(yīng)用于生物行業(yè)。
1.細(xì)胞系實驗室凍存盒平時放4度,需要凍細(xì)胞時直接拿出來用就可以了。第二天轉(zhuǎn)移至液氮,貴重的細(xì)胞盡快轉(zhuǎn)移,不然會影響復(fù)蘇成活率的。一般是用5次就更換一下異丙醇?,F(xiàn)在也有一些商品化凍存液可以直接丟進(jìn)-80的,很方便,效果也不錯的。
2.異丙醇的量是要保證的,不能低于表明的線,否則不能起到很好的程序性降溫作用,我們是在4度放置,放了細(xì)胞后立馬放到-80度冰箱,第二天再轉(zhuǎn)移到液氮,效果很不錯。異丙醇熔點:-87.9度的色透明具有乙醇?xì)馕兜目扇夹杂卸疽后w。注意了有可燃性!急性毒性:口服-大鼠LD50:5840毫克/公斤;口服-小鼠LC50:3600毫克/公斤。刺激數(shù)據(jù):眼睛-兔子100毫克/!請注意清理!
3.細(xì)胞系應(yīng)該不可以把凍存盒放4°的,因為梯度降溫的起始點是室溫20°左右,所以從-80℃拿出來的凍存盒應(yīng)該現(xiàn)在室溫靜置一段時間待其恢復(fù)到室溫再使用。而其中的異丙醇應(yīng)使用6~7此后更換一次,而且保證液體量達(dá)到刻度線,否則降溫效果會受到影響。
4.凍存盒里的異丙醇一般是250ml,低于刻度了要加上,理論上是5次以后更換異丙醇,但是異丙醇對環(huán)境有害,我們可以多用幾次,只是少了的時候要加滿。還有凍存液里面的DMSO對細(xì)胞有毒性,尤其是室溫的時候,所以凍存盒和凍存液先放4°,等把細(xì)胞用凍存液重懸好了放在凍存盒里,還放回4°,細(xì)胞系等到出細(xì)胞間的時候再拿到-80°里面保存。